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Erin Easlon - Biología

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Erin Easlon

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Resultado de la investigación: Contribución a la revista ›Artículo› revisión por pares

T1: la dihidrolipoamida acetiltransferasa es un factor de longevidad metabólico novedoso y se requiere para la extensión de la vida útil mediada por la restricción de calorías.

N2: la restricción calórica (RC) extiende la vida útil en una amplia variedad de especies. Estudios recientes sugieren que un aumento en el metabolismo mitocondrial media la extensión del ciclo de vida inducida por CR. Aquí presentamos evidencia de que Lat1 (dihidrolipoamida acetiltransferasa), el componente E2 del complejo piruvato deshidrogenasa mitocondrial, es un nuevo factor de longevidad metabólica en la vía CR. La eliminación del gen LAT1 anula la extensión de la vida útil inducida por CR. La sobreexpresión de Lat1 extiende la vida útil, y la CR no aumenta esta extensión de la vida útil. De manera similar a la RC, la extensión de la vida útil por sobreexpresión de Lat1 requiere en gran medida la respiración mitocondrial, lo que indica que el metabolismo mitocondrial juega un papel importante en la RC. Curiosamente, la sobreexpresión de Lat1 no requiere que la familia Sir2 extienda la vida útil, lo que sugiere que Lat1 media una rama de la vía CR que funciona en paralelo a la familia Sir2. Lat1 también es un factor limitante de longevidad en las células que no se dividen, ya que la sobreexpresión de Lat1 extiende la supervivencia celular durante el cultivo prolongado en la fase estacionaria. Nuestros estudios sugieren que la sobreexpresión de Lat1 prolonga la vida útil al aumentar la aptitud metabólica de la célula. Por lo tanto, la RC también puede extender la vida útil y mejorar las enfermedades asociadas con la edad al aumentar la aptitud metabólica a través de la regulación de las enzimas metabólicas centrales.

AB: la restricción calórica (CR) extiende la vida útil en una amplia variedad de especies. Estudios recientes sugieren que un aumento en el metabolismo mitocondrial media la extensión del ciclo de vida inducida por CR. Aquí presentamos evidencia de que Lat1 (dihidrolipoamida acetiltransferasa), el componente E2 del complejo piruvato deshidrogenasa mitocondrial, es un nuevo factor de longevidad metabólica en la vía CR. La eliminación del gen LAT1 anula la extensión de la vida útil inducida por CR. La sobreexpresión de Lat1 extiende la vida útil, y la CR no aumenta aún más esta extensión de vida. De manera similar a la RC, la extensión de la vida útil por sobreexpresión de Lat1 requiere en gran medida la respiración mitocondrial, lo que indica que el metabolismo mitocondrial juega un papel importante en la RC. Curiosamente, la sobreexpresión de Lat1 no requiere que la familia Sir2 extienda la vida útil, lo que sugiere que Lat1 media una rama de la vía CR que funciona en paralelo a la familia Sir2. Lat1 también es un factor limitante de longevidad en las células que no se dividen, ya que la sobreexpresión de Lat1 extiende la supervivencia celular durante el cultivo prolongado en la fase estacionaria. Nuestros estudios sugieren que la sobreexpresión de Lat1 prolonga la vida útil al aumentar la aptitud metabólica de la célula. Por lo tanto, la RC también puede extender la vida útil y mejorar las enfermedades asociadas con la edad al aumentar la aptitud metabólica a través de la regulación de las enzimas metabólicas centrales.


Los efectos de la capacitación basada en la práctica en los asistentes de enseñanza graduados y las prácticas en el aula # x2019

La enseñanza basada en evidencias es una habilidad muy compleja, que requiere ciclos repetidos de práctica deliberada y retroalimentación para dominarla. A pesar de los marcos existentes bien caracterizados para la formación basada en la práctica en la formación del profesorado K-12, los principios fundamentales de estos marcos aún no se han transferido al desarrollo de instructores en contextos de educación superior, incluida la formación de asistentes docentes graduados (GTA). Buscamos determinar si un programa de capacitación basado en la práctica podría ayudar a los GTA a aprender y usar métodos de enseñanza basados ​​en evidencia en sus aulas. Implementamos un programa de capacitación semanal para los GTA de introducción a la biología que incluía simulacros estructurados de técnicas seleccionadas para mejorar la práctica de los estudiantes, el desarrollo lógico y la responsabilidad y reducir la aprensión. Estos elementos fueron seleccionados en base a su caracterización previa como dimensiones del aprendizaje activo. Los GTA recibieron comentarios regulares sobre el desempeño basados ​​en las observaciones del aula. Para cuantificar el uso de las técnicas objetivo y los niveles de participación de los estudiantes, recopilamos y codificamos 160 h de metraje de video. Investigamos la relación entre la frecuencia de implementación de GTA de las técnicas objetivo y los puntajes de los exámenes de los estudiantes, sin embargo, no observamos una relación significativa. Aunque los GTA adoptaron y utilizaron muchas de las técnicas objetivo con alta frecuencia, las técnicas que exigían la participación de los estudiantes no se adoptaron de manera estable y su uso no respondía a la retroalimentación formal. También encontramos que las técnicas discutidas en el entrenamiento, pero no practicadas, no se usaron en frecuencias cuantificables, lo que respalda aún más la importancia del entrenamiento basado en la práctica para influir en las prácticas de instrucción.


Lo mejor de ambos mundos: aprovechando los protocolos de observación COPUS y RTOP para medir de manera fácil y confiable varios niveles de práctica educativa reformada

Los investigadores, administradores universitarios y miembros de la facultad están cada vez más interesados ​​en medir y describir las prácticas de instrucción proporcionadas en los cursos de ciencia, tecnología, ingeniería y matemáticas (STEM) a nivel universitario. Específicamente, existe un gran interés en comparar las prácticas de instrucción entre los cursos, monitorear los cambios a lo largo del tiempo y mapear las prácticas observadas con la enseñanza basada en la investigación. Si bien los protocolos de observación cada vez más comunes (Protocolo de observación de la enseñanza reformada [RTOP] y Protocolo de observación en el aula en STEM de pregrado [COPUS]) a nivel postsecundario ayudan a lograr algunos de estos objetivos, también adolecen de debilidades que limitan su aplicabilidad. En este estudio, aprovechamos las fortalezas de estos protocolos para proporcionar un método sencillo que permite la caracterización confiable y válida de las prácticas de instrucción. Este método se desarrolló empíricamente a través de un análisis de conglomerados utilizando observaciones de 269 períodos de clase individuales, correspondientes a 73 profesores diferentes, 28 instituciones de investigación intensiva diferentes y varias disciplinas STEM. Diez grupos, llamados perfiles COPUS, surgieron de este análisis y representan los tipos más comunes de prácticas de instrucción promulgadas en las aulas observadas para este estudio. Las puntuaciones RTOP se utilizaron para validar la alineación de los 10 perfiles COPUS con la enseñanza reformada. A continuación, presentamos una descripción detallada del método de análisis de conglomerados, los perfiles COPUS y la distribución de los perfiles COPUS en varios cursos STEM en universidades de investigación intensiva.


Abstracto

La levadura Saccharomyces cerevisiae produce dos proteínas 14-3-3, Bmh1 y Bmh2, cuyas funciones exactas no están claras. Aquí, realizamos un análisis proteómico completo utilizando espectrometría de masas y purificación por inmunoafinidad de varios pasos e identificamos 271 proteínas de levadura que se unen específicamente a Bmh1 y -2 de una manera dependiente de la fosforilación. Las proteínas identificadas tienen diversas funciones bioquímicas y roles celulares, incluida la señalización celular, el metabolismo y la regulación del ciclo celular. Es importante destacar que hay varios subconjuntos de proteínas que participan en la regulación de la fisiología de la levadura a través de una variedad de vías de señalización celular, incluida la transcripción inducida por estrés, la división celular y la síntesis de quitina en la pared celular. De hecho, encontramos que un mutante de levadura deficiente en Bmh1 y -2 tenía defectos en la respuesta dependiente de la señal de la cascada MAPK (Hog1 y Mpk1) y exhibía una acumulación anormal de quitina en el cuello de la yema. Proponemos que Bmh1 y -2 son reguladores comunes de muchos módulos de señalización celular y vías mediadas por la fosforilación de proteínas y regulan una variedad de eventos biológicos controlando coordinadamente los componentes de fosfoproteína multiplex identificados.

Este trabajo fue apoyado en parte por Becas en Ayuda para Investigación Científica, Becas para el Proyecto del Sistema Integrado de Proteómica, Investigación Pionera sobre la Frontera del Genoma de MEXT de Japón y el programa MEXT “Iniciativas de Educación Atractiva en Escuelas de Posgrado”.

Universidad Metropolitana de Tokio.

CREST, Agencia de Ciencia y Tecnología de Japón.

Instituto de Ciencias de la Vida Mitsubishi Kagaku.

A quién debe dirigirse la correspondencia: Departamento de Química Aplicada, Academia de Defensa Nacional, Yokosuka, Kanagawa 239-8686, Japón. Teléfono: 81468 41 3810, ext. 3563. Fax: 81 468 44 5901. Correo electrónico: [email & # 160protected]

Dirección actual: Departamento de Química Aplicada, Academia de Defensa Nacional, Yokosuka, Kanagawa 239-8686, Japón.


La combinación de la discusión entre compañeros con la explicación del instructor aumenta el aprendizaje de los estudiantes a partir de las preguntas conceptuales en clase

El uso de preguntas conceptuales en clase con clickers puede transformar un entorno "transmisionista" centrado en el instructor en un aula constructivista más centrada en el alumno. Para comparar la efectividad de tres enfoques diferentes usando clickers, se usaron pares de preguntas similares para monitorear la comprensión de los estudiantes en los cursos de genética de especialización y no especialización. Después de responder la primera pregunta de forma individual, los estudiantes participaron solo en la discusión entre pares, escucharon solo la explicación del instructor o participaron en una discusión entre pares seguida de una explicación del instructor, antes de responder una segunda pregunta individualmente. Nuestros resultados muestran que la combinación de discusión entre compañeros seguida de la explicación del instructor mejoró sustancialmente el desempeño promedio de los estudiantes en comparación con cualquiera de los dos. Cuando se analizaron las ganancias en el aprendizaje para tres grupos de estudiantes de habilidades (débil, medio y fuerte, según el rendimiento general del clicker), todos los grupos se beneficiaron más del enfoque combinado, lo que sugiere que la discusión entre pares y la explicación del instructor son sinérgicas para ayudar a los estudiantes. Sin embargo, este análisis también reveló que, para los que no eran mayores, las ganancias de los que tenían un desempeño débil usando el enfoque de combinación fueron solo ligeramente mejores que sus ganancias usando solo la explicación del instructor. Por el contrario, el enfoque de solo instructor no ayudó a los estudiantes de alto desempeño en ambos cursos, lo que enfatiza la importancia de la discusión entre pares, incluso entre los estudiantes de alto desempeño.


Expresión, purificación y caracterización de la proteína de unión a dihidrolipoamida deshidrogenasa del complejo piruvato deshidrogenasa de Saccharomyces cerevisiae

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Nota: En lugar de un resumen, esta es la primera página del artículo.


Los componentes lanzadera malato-aspartato NADH son nuevos reguladores metabólicos de longevidad necesarios para la extensión de la vida útil mediada por la restricción de calorías en la levadura

Estudios recientes sugieren que el aumento del metabolismo mitocondrial y la disminución concomitante de los niveles de NADH median la extensión de la vida útil inducida por la restricción calórica (RC). La membrana interna mitocondrial es impermeable a NAD (dinucleótido de nicotinamida y adenina, forma oxidada) y NADH, y no está claro cómo la CR transmite el aumento del metabolismo mitocondrial a múltiples vías celulares que residen en compartimentos espacialmente distintos. Aquí mostramos que los componentes mitocondriales de la lanzadera malato-aspartato NADH (Mdh1 [malato deshidrogenasa] y Aat1 [aspartato aminotransferasa]) y la lanzadera glicerol-3-fosfato (Gut2, glicerol-3-fosfato deshidrogenasa) son nuevos factores de longevidad en la vía CR en levadura. La sobreexpresión de Mdh1, Aat1 y Gut2 prolonga la vida útil y no crea sinergia con CR. Las sobreexpresiones de Mdh1 y Aat1 requieren tanto la respiración como la familia Sir2 para prolongar la vida útil. los mdh1Δaat1Δ La doble mutación bloquea la prolongación de la vida mediada por CR y también previene la disminución característica de los niveles de NADH en la reserva citosólica / nuclear, lo que sugiere que el transbordador malato-aspartato juega un papel importante en la activación de los objetivos aguas abajo de CR como Sir2. La sobreexpresión de las lanzaderas NADH también puede prolongar la vida útil al aumentar la aptitud metabólica de las células. Juntos, estos datos sugieren que la RC puede prolongar la vida útil y mejorar las enfermedades metabólicas asociadas a la edad activando componentes de las lanzaderas NADH.


Abstracto

La levadura Saccharomyces cerevisiae produce dos proteínas 14-3-3, Bmh1 y Bmh2, cuyas funciones exactas no están claras. Aquí, realizamos un análisis proteómico completo utilizando espectrometría de masas y purificación por inmunoafinidad de varios pasos e identificamos 271 proteínas de levadura que se unen específicamente a Bmh1 y -2 de una manera dependiente de la fosforilación. Las proteínas identificadas tienen diversas funciones bioquímicas y roles celulares, incluida la señalización celular, el metabolismo y la regulación del ciclo celular. Es importante destacar que hay varios subconjuntos de proteínas que participan en la regulación de la fisiología de la levadura a través de una variedad de vías de señalización celular, incluida la transcripción inducida por estrés, la división celular y la síntesis de quitina en la pared celular. De hecho, encontramos que un mutante de levadura deficiente en Bmh1 y -2 tenía defectos en la respuesta dependiente de la señal de la cascada MAPK (Hog1 y Mpk1) y exhibía una acumulación anormal de quitina en el cuello de la yema. Proponemos que Bmh1 y -2 son reguladores comunes de muchos módulos de señalización celular y vías mediadas por la fosforilación de proteínas y regulan una variedad de eventos biológicos controlando coordinadamente los componentes de fosfoproteína multiplex identificados.

Este trabajo fue apoyado en parte por Becas en Ayuda para Investigación Científica, Becas para el Proyecto del Sistema Integrado de Proteómica, Investigación Pionera sobre la Frontera del Genoma de MEXT de Japón y el programa MEXT “Iniciativas de Educación Atractiva en Escuelas de Posgrado”.

Universidad Metropolitana de Tokio.

CREST, Agencia de Ciencia y Tecnología de Japón.

Instituto de Ciencias de la Vida Mitsubishi Kagaku.

A quién debe dirigirse la correspondencia: Departamento de Química Aplicada, Academia de Defensa Nacional, Yokosuka, Kanagawa 239-8686, Japón. Teléfono: 81468 41 3810, ext. 3563. Fax: 81 468 44 5901. Correo electrónico: [email & # 160protected]

Dirección actual: Departamento de Química Aplicada, Academia de Defensa Nacional, Yokosuka, Kanagawa 239-8686, Japón.